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常见问题

微生物磨练基础知识有哪些

宣布日期2020-07-21 浏览 229117 次

一、分类
细菌属于原核细胞型微生物。
最准确的要领为遗传学分类要领。
最常用的是经典古板分类法：凭证细菌的亲缘关系，界门纲目科属种型株分类。
科：由配合关系的属组成，如肠杆菌科；
属：是种的高一级分类单位，通常包括有配合特征或关系亲近的种，用以形貌微生物的主要特征，如埃希氏菌属；
种：是分类品级的基本单位，统一种微生物形态、心理学特征和组成因素基内情同，用以形貌微生物的次要特征，如大肠埃希氏菌；
菌株或品系：统一种微生物中差别泉源的纯作育物，如大肠埃希氏菌CGMCC 1.3373。

二、细菌形态学及形态学检查法
细菌形态结构主要指细菌的巨细、形状、排列及超微结构。细菌结构与其心理功效、致病性、免疫性有关。
2.1 形态结构
2.1.1 基本形态3类：球菌、杆菌、螺旋菌，杆菌是最常见的形态。
2.1.2 巨细
丈量细菌巨细的单位为微米μm。球菌以直径体现巨细，杆菌以长与宽体现巨细，统一种细菌在差别情形下巨细形态也有差别：涂片干燥、牢靠、染色时细菌缩短；快速生长的球菌往往呈短杆状。
菌龄与细菌巨细的关系受许多因素影响，主要与代谢废物的积累及作育基中渗透压上升等因素有关。
2.1.3 结构
基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质；
特殊结构：鞭毛、菌毛、荚膜、芽孢等。
菌毛是什么？
菌毛（Pilus）许多革兰氏阴性菌菌体外貌遍布的比鞭毛更为细、短、直、硬、多的丝状卵白隶属器，也叫做纤毛（Fimbriae)。其化学组成是菌毛卵白（Pilin），菌毛与运动无关。菌毛可分为通俗菌毛(Commonpilus)和性菌毛(Sexpilus)两种。通俗菌毛长0.3～1.0um,直径7nm。具有粘着细胞（红细胞、上皮细胞）和假寓种种细胞外貌的能力，它与某些细菌的致病性有关。无菌毛的细菌则易被粘膜细胞的纤毛运动、肠蠕动或尿液冲洗而被扫除，失去菌毛，致病力亦随之损失。性菌毛有的细菌尚有1～4根较长的性菌毛，比通俗菌毛而粗，中空呈管状。性菌毛由质粒携带的一种致育因子（Ferility factor）的基因编码，故性菌毛又称F菌毛。带有性菌毛的细菌称为F+菌或雄性菌，无性菌毛的细菌称为F-菌或雌性菌。F+菌体内的质�；蛉旧錎NA可通过中空的性菌毛进入F-菌体内，这个历程称为接合（conjugation）。细菌的毒性及耐药性等性状可通过此方法转达，这是某些肠道杆菌容易爆发耐药性的缘故原由之一。
2.2 形态学检查法
分为不染色标本检查法和染色标本检查法。
不染色标本检查法：依赖通俗显微镜，虽可视察细菌巨细、形态，但主要用于视察细菌的动力。
视察细菌有动力时，应选用新鲜的幼龄作育物（对数期），并在20℃以上室温中举行，同时应掌握区别细菌真正运动与溶胶的布朗运动。常用的要领有压滴法、悬滴法、暗视野映光法等。
染色标本磨练法：分为单染色法、复染色法、特殊染色法。
视察细菌菌毛应使用鞭毛染色法。
细菌学中最常用的判别染色法是革兰氏染色法。
基本办法为：涂片→干燥→牢靠→染色
革兰氏染色的效果与作育基因素、作育条件及操作手艺等有着亲近关系。酒精脱色为要害办法。
三、细菌心理学
3.1 化学组成
水、卵白质、糖类、脂类、无机盐、核酸、维生素，种种组成随细菌种类、菌龄、细菌所处情形差别而有差别。
固形因素占菌体质量15%~25%，其中碳、氢、氧、氮四种元素占90%~97%，其他元素占3%~10%。
水分：占细菌质量75%~85%，芽孢约40%。滋生体内主要是游离水，芽孢内主要是团结水。团结水不易蒸发，不冻结，不可作为溶剂，也不可渗透。
卵白质：漫衍在菌体各个组成部分，占菌体固形因素50%~80%。除少量白卵白、球卵白等纯粹卵白质外，绝大部分与其他物质团结成复合卵白质，如核卵白、糖卵白、脂卵白等，其中核卵白含量最高。卵白质是维持细菌生运气动的最基本物质，是细菌酶类的主要组成部分。
核酸：分RNA（细胞质、细胞膜中，约占固形因素10%）与DNA（染色体、质粒中，占固形因素3%左右）两种。
糖类：占固形因素10%~30%，主要以多糖形式保存，如荚膜多糖、纤维素、淀粉、糖原等。
脂类：细菌体内能量贮存场合。
无机盐类：调理剂渗透压和维持酶活性的作用。
其他：生长因子主要是B族维生素，大大都是菌体内的辅酶因素。色素种类许多，一样平常都是含氮的有机物。
3.2 物理性状
带电征象：菌体卵白质由许多氨基酸组成。氨基酸是兼性离子，在等电点时，其所带正电荷与负电荷相等。革兰氏阳性菌pH2~3，革兰氏阴性菌pH4~5。一样平常作育、染色、血清学试验中，大都为中性或弱碱性情形，pH值高于细菌等电点，均带负电荷�Ｇ樾沃衟H值越高所带负电荷越多。带电征象与细菌的染色反应、凝集反应、抑菌、杀菌作用等都有亲近关系。
多相胶体：原生质中具有多种卵白质，因素结构各不相同，为多相胶体，因此可同时举行种种性子差别的生化反应。细胞外浓度较低的化学物质可被原生质中的某一相选择性的吸收浓缩于细胞内。
外貌积：单位体积的外貌积比其他大生物的外貌积大。每立方厘米葡萄球菌的外貌积为60000cm2。因而细菌代谢活跃，滋生速率很快，同样对外界情形因素的影响也十分敏感。
布朗运动：在溶液中，因受到疏散酶分子的撞击，爆发不移动位置的颤抖，叫做布朗运动。
光学性子：菌体呈半透明状态，光线照射菌体时，一部分光被吸收，一部分光爆发散射，以是细菌悬液泛起污浊征象。
渗透性：细菌的细胞壁和细胞膜都有半渗透性，吸收营养和代谢产品均依赖于这种通透作用。细菌具有坚韧的细胞壁，除能耐受菌体内部的高渗透压外，还能�；は妇谏秆菇系偷那樾沃胁恢缕扑�，但在纯水中也难免吸收水分而胀裂。
3.3 代谢
细菌为了生长滋生，必需从情形中吸收营养物质作为能源和基实质料，并倾轧不需要的产品，这些生化历程称为细菌的代谢，包括剖析代谢和合成代谢。
3.3.1 剖析代谢及生化反应
界说：将重大的营养物质剖析为简朴的化合物，一方面提供合成菌体因素的质料，一方面从物质剖析中获得能量。
（1）糖类：大大都细菌能使用糖，由于种种细菌所具有的酶系统差别，故剖析糖类的能力也差别�；镜奶谴焕蹋憾嗵恰ヌ恰�，而丙酸酮进一步剖析的后续历程则因种种细菌而异。
1）糖发酵试验：经常用于细菌的判别。如大肠埃希氏菌，使丙酮酸天生甲酸，并由甲酸解氢酶剖析甲酸天生CO2和H2，以是剖析葡萄糖时产酸产气；而伤寒杆菌只有使丙酮酸天生甲酸的能力，剖析葡萄糖只能产酸不可产气。
2）V-P试验：产气杆菌能使丙酮酸脱羧，天生中性乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在碱性溶液中被大气中的氧分子氧化，天生红色化合物，这一反应成为V-P试验阳性。大肠埃希氏菌不天生乙酰甲基甲醇，故阴性。该实验肠道菌必做。
3）甲基红试验：在上述产气杆菌作育液中，由于2个分子的丙酮酸已变为1个分子的中性乙酰甲基甲醇（位于有氧无氧剖析的接壤点上），天生的酸量就响应镌汰，故pH值响应较高（pH5.4以上），用甲基红做指示剂时，作育液泛起橘黄色，称为甲基红试验阴性。而大肠埃希氏菌因剖析丙酮酸时不爆发乙酰甲基甲醇，爆发的酸较多，故作育液的pH值下降到4.5或更低，因此甲基红指示剂呈红色反应，即阳性。
（2）卵白质：卵白质分子量大，不可被菌体直接吸收作为营养基质，有须要先通详尽菌的胞外酶，如卵白酶，把卵白质剖析成为能透进细胞壁与细胞膜的多肽或氨基酸，才华运转入菌细胞内被使用。细菌剖析卵白质的历程一样平常为：卵白质→卵白?（音“示”）→卵白胨→多肽→氨基酸。差别细菌剖析卵白质的能力差别，可用明胶液化试验或卵白质消化试验来判别细菌的种类。氨基端进一步剖析主要分三种方法举行：脱氨基作用、脱羧基作用、其他剖析作用（天生吲哚、天生硫化氢、剖析尿素）。
（3）枸橼酸盐使用试验：产气杆菌能使用枸橼酸盐作为碳源，因而在仅含枸橼酸盐而不含其他碳源的作育基上生长，剖析枸橼酸盐天生碳酸盐，使作育基由原来的中性变为碱性，以溴麝香草酚蓝为指示剂可显示出作育基由绿色变为深蓝色，即枸橼酸盐阳性。相反，大肠杆菌不可使用枸橼酸盐为唯一碳源，故不可在此作育基上生长，作育基颜色稳固，为阴性反应。
3.3.2 合成代谢及其产品
（1）毒素与侵袭性酶：
细菌爆发的内毒素和外毒素均有强烈毒性，尤以外毒素为甚。
内毒素为革兰氏阴性菌的细胞壁因素，即脂多糖，其毒性保存于脂类A部分，当菌体殒命崩解后才游离出来。其性子稳固，加热至160℃2~4h或用强酸、强碱或强氧化剂加温煮沸30min才灭活。
外毒素是卵白质，在细菌生涯历程中即可释放出菌体。爆发外毒素的细菌大多是革兰氏阳性菌，但也有少数革兰氏阴性菌。其性子不稳固，易被热（50~60℃20~120min）破损。
某些细菌还能爆发具有侵袭性的酶，能损伤机体组织，如产气荚膜梭菌的卵磷脂酶、链球菌的透明质酸酶等。
（2）热原质：许多革兰氏阴性杆菌能爆发一种多糖，将它注入人体或动物体内能引起发热反应，故称热原质。121℃20min也不可破损。用吸附剂和特制石棉滤板可除去输液中的大部分热源质，玻璃器皿上的热原质则需在250℃高温下干烤才华破损。如变形杆菌、铜绿假单胞菌（旧称绿脓杆菌）。
（3）色素：有些细菌在一定条件下（氧气富足、温度相宜或袒露阳光）能爆发种种颜色的色素。爆发的色素有的能溶于水而扩散至周围情形中，另一些色素为脂溶性不溶于水仅使菌落自己有色。
（4）抗生素：主要是由某些微生物在代谢历程中爆发的一种抗生物质，能抑制或杀死某些生物细胞（主要是微生物和肿瘤细胞）�？股刂饕煞畔呔驼婢�，由细菌爆发的较少，只有多黏芽孢杆菌爆发的一组多肽类抗生素（多黏菌素）和由第一芽孢杆菌爆发的多肽类抗生素（杆菌肽）等少数几种。
（5）细胞素：某系细菌种株间爆发的一类具有抗菌作用的卵白质。与抗生素差别，其抗菌规模狭窄，仅对爆发与细胞素的菌株有近缘关系的细菌才有抑杀作用。由于其具有特异性，已用于细菌种内的分型。
（6）维生素：维生素是细菌必需的生长因子，有些细菌能自己合成，除供菌体自己所需外，也能渗透至菌体外。人体肠道内的大肠埃希氏菌能合成维生素B6、B12、K2等，可供人体所需。

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